避免冰晶与脱落!樱花OCT包埋剂的正确使用流程与常见误区
更新时间:2026-02-04 点击次数:51次
樱花OCT包埋剂是病理切片制备中的核心辅助材料,主要用于冷冻切片时固定组织样本,凭借良好的黏性、低温稳定性及与组织的相容性,保障切片完整、形态清晰,广泛应用于临床病理诊断、科研组织学分析等场景。冷冻切片中,冰晶形成与切片脱落是两大高发问题,会严重影响染色效果与病理观察,因此规范
樱花OCT包埋剂的使用流程、规避常见误区,是提升冷冻切片质量的关键。
樱花OCT包埋剂的正确使用流程,需围绕“样本预处理-包埋操作-冷冻固化-切片衔接”四大步骤,重点防控冰晶与脱落隐患。第一步,样本预处理,需先将新鲜组织修剪至合适大小(一般不超过5mm×5mm×3mm),快速用生理盐水冲洗去除血液、黏液等杂质,避免残留污染物影响包埋黏性;若组织含大量水分,需用滤纸轻轻吸干表面水分,减少冰晶形成的源头。同时,包埋剂需提前回温至室温,避免低温状态下倒入时产生气泡,气泡会导致组织固定不牢,增加脱落风险。
第二步,包埋操作,选用适配的包埋盒,先倒入少量OCT包埋剂铺底,厚度约1-2mm,待底部包埋剂初步凝固后,将处理好的组织样本平稳放入,调整样本姿态(确保待切片面朝下),再缓慢注入包埋剂,直至全数覆盖样本,避免用力倾倒产生气泡,气泡会导致组织与包埋剂贴合不紧密。第三步,冷冻固化,将包埋盒放入-20℃冷冻台或液氮中,静置15-20分钟,确保包埋剂与样本全数凝固,固化速度需均匀,避免快速冷冻导致组织内部形成大量冰晶,也需防止固化不全导致切片时脱落。
第四步,切片衔接,固化完成后,将包埋块从包埋盒中取出,固定在冷冻切片机上,调整切片厚度(常规3-5μm),切片前需用冷冻切片机低温预冷5分钟,确保包埋块与切片刀温度适配,减少切片时的应力损伤,避免脱落。切片后及时将切片转移至载玻片上,快速固定,完成后续染色流程。
使用过程中需重点规避三大常见误区,杜绝冰晶与脱落问题。误区一,直接用低温包埋剂包埋新鲜组织,低温包埋剂会导致组织水分快速凝固,形成大量冰晶,破坏组织细胞形态,正确做法是将包埋剂回温至室温后使用。误区二,组织未脱水或表面有水分就包埋,水分会降低包埋剂黏性,导致切片脱落,同时加剧冰晶形成,需吸干组织表面水分。
误区三,冷冻固化不全或过度冷冻,固化不全会导致包埋块松软、切片脱落;过度冷冻会使包埋块变脆,切片易碎裂,需严格控制冷冻温度与时间。此外,包埋剂反复冻融易降低黏性,需密封保存,避免多次取用后反复冻融;包埋时避免包埋剂过少,需确保全数覆盖样本,形成稳定的支撑结构。
规范樱花OCT包埋剂的使用流程,做好样本预处理与冷冻固化管控,规避常见使用误区,是避免冰晶形成、防止切片脱落的核心。正确使用可较大化发挥其固定与支撑作用,保障冷冻切片质量,为病理诊断与科研分析提供精准的组织形态依据。
