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冷冻包埋剂在速冻中的应用

发布时间:2022-11-23   点击次数:116次
  冷冻包埋剂是对冷冻切片质量一重要影响因素,包埋剂用量要适宜,过多或过少都会影响标本冷冻质量。常用的有三种包埋剂OCT剂、B超藕合剂以及普通胶水。B超藕合剂适用于细胞丰富质地较嫩的组织,普通胶水或OCT剂适用于纤维丰富质地偏硬组织。(OCT包埋剂骤冷时固化,其冷冻速度和软硬韧度与组织相近,其还具有水溶性,不影响染色等优点。)
 
  当切片时,如果发现冰冻过度时,可将冰冻的组织连同支承器取出来,在室温停留片刻,再行切片,或者用口中哈气,或者用大拇指按压组织块,以此来软化组织,再行切片。另者,调高冰冻点。
 
  解剖之后迅速取出所需的新鲜组织,用干纱布或滤纸擦干后不需固定直接取材(24×24×2mm*),以防形成冰晶造成切片中形成形状不一的空泡,使细胞内结构移位。
 
  取材中目的标本既要明确也要确保其结构的完整性,应避免不必要的脂肪及坏死组织附着;要尽量剔除毛发、硬骨或钙化物;保乳手术切缘由于脂肪组织较多,取材厚度不要超过3mm,厚者冰冻费时,大者难以切完整。甲状腺及淋巴结组织要带全组织被膜并除去多余的脂肪组织。
 
  速冻:
 
  1、将组织块平放于软塑瓶盖或特制小盒内(直径约2cm)。
 
  2、如组织块小可适量加冷冻包埋剂浸没组织,然后将特制小盒缓缓平放入盛有液氮的小杯内。
 
  3、当盒底部接触液氮时即开始气化沸腾,此时小盒保持原位切勿浸入液氮中,大约10-20s组织即迅速冰结成块。
 
  4、在制成冻块后,即可置入恒冷箱切片机冰冻切片。
 
  5、若需要保存,应快速以铝箔或塑料薄膜封包,立即置入-80℃冰箱贮存备用。

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