冷冻包埋剂在速冻中的应用

　　冷冻包埋剂是对冷冻切片质量一重要影响因素，包埋剂用量要适宜，过多或过少都会影响标本冷冻质量。常用的有三种包埋剂OCT剂、B超藕合剂以及普通胶水。B超藕合剂适用于细胞丰富质地较嫩的组织，普通胶水或OCT剂适用于纤维丰富质地偏硬组织。（OCT包埋剂骤冷时固化，其冷冻速度和软硬韧度与组织相近，其还具有水溶性，不影响染色等优点。）

 

　　当切片时，如果发现冰冻过度时，可将冰冻的组织连同支承器取出来，在室温停留片刻，再行切片，或者用口中哈气，或者用大拇指按压组织块，以此来软化组织，再行切片。另者，调高冰冻点。

 

　　解剖之后迅速取出所需的新鲜组织，用干纱布或滤纸擦干后不需固定直接取材（24×24×2mm＊），以防形成冰晶造成切片中形成形状不一的空泡，使细胞内结构移位。

 

　　取材中目的标本既要明确也要确保其结构的完整性，应避免不必要的脂肪及坏死组织附着；要尽量剔除毛发、硬骨或钙化物；保乳手术切缘由于脂肪组织较多，取材厚度不要超过3mm，厚者冰冻费时，大者难以切完整。甲状腺及淋巴结组织要带全组织被膜并除去多余的脂肪组织。

 

　　速冻：

 

　　1、将组织块平放于软塑瓶盖或特制小盒内（直径约2cm）。

 

　　2、如组织块小可适量加冷冻包埋剂浸没组织，然后将特制小盒缓缓平放入盛有液氮的小杯内。

 

　　3、当盒底部接触液氮时即开始气化沸腾，此时小盒保持原位切勿浸入液氮中，大约10－20s组织即迅速冰结成块。

 

　　4、在制成冻块后，即可置入恒冷箱切片机冰冻切片。

 

　　5、若需要保存，应快速以铝箔或塑料薄膜封包，立即置入－80℃冰箱贮存备用。