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冰冻切片包埋剂的包埋流程你真的了解吗?

发布时间:2021-12-15   点击次数:159次
   冰冻切片包埋剂是一种聚乙二醇和聚乙烯醇的水溶性混合物,目前已广泛用于免疫组化实验室中,其用途是在冰冻切片时支撑组织,以增加组织的连续性,减少皱折及碎裂。又因OCT混合物为水溶性,故在漂片时可溶于水,所以在以后的染色中不会增加背景染色。
利用OCT混合物(opti-mumcuttingtemperaturecompound)预先浸润组织,然后再进行恒冷箱切片,使切片质量得到改善。
  目前实验室使用的冰冻切片包埋剂主流产品是日本樱花公司的O.C.T.Compound,118ml/瓶,质量稳定,研究者比较熟习。
  在使用OCT进行包埋时,对于包埋模具而言,您可以选择厂家已有的产品,也可以根据实际条件利用手边已有的包埋管、包埋板等;也有心灵手巧的研究者自己利用铜版纸折叠出很漂亮实用的OCT包埋模具(当然前提是您的用量要少)。
  OCT包埋剂(SAKURA产品)包埋流程:
  1.将放在蔗糖溶液中的组织块取出,放入20gL-1蔗糖与OCT包埋剂1:1体积比例混合液中,室温浸
  泡2h
  2.移入OCT包埋剂中室温浸泡4h,更换新的OCT包埋剂,室温浸泡6h.
  3.将标本置于托物台,用恒冷箱切片机切片(一般-22℃),片厚10μm,贴于预处理的载玻片上,-20℃冰箱保存。
  在实际工作中,有研究者发现当包埋的样本体积较大或者冰冻温度要求更低一点时,使用樱花的Oct进行包埋往往很难取得理想的包埋结果。当您遇到这样的麻烦时,我们建议您采用另外一种Oct包埋剂TissueFreezingMedium,美国TBS公司生产。
  如果该文对您的学习和研究能有丝毫帮助,我们都会备感欣慰。

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